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elisa实验步骤,ELISA实验步骤有哪些?

admin admin 发表于2024-03-15 10:36:06 浏览17 评论0

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本文目录一览:

elisa实验步骤

elisa实验步骤如下
方法一,用于检测未知抗原的双抗体夹心法
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3.加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4.加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5.终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
方法二,用于检测未知抗体的间接法
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。
(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。

elisa实验步骤和每步原理

ELISA酶联免疫吸附实验
1.原理:免疫分析是一种利用特定抗体与抗原或半抗原发生的高选择性高特异性识别和结合原理,对待测抗体或者抗原进行分析测定的方法,酶联免疫吸附分析(下称ELISA)是免疫分析的一种,分三个部分组成:免疫识别,信号输出和数据处理。
2.步骤:免疫识别是在聚苯乙烯制成的96孔板上包被抗体,而后利用抗体识别待测的抗原(通常是疾病的蛋白质生物标记物,病毒,细菌等等,从复杂待测液中将抗原吸附到96孔板表面。接着用带有辣根过氧化酶(Horseradish Peroxidase, HRP)、荧光或放射性标记的抗体通过直接或者间接的方式输出识别信号。最后利用信号强度,标准样品浓度梯度等信息计算得出待测样中目标抗原的浓度。
3.分类:根据免疫识别和信号输出方式的不同,ELISA可以分为双抗体夹心法、直接免疫竞争法和非直接免疫竞争法等等。其中双抗体夹心法在商业应用上最常见。
双抗体夹心法:
①:抗体包被 在96孔板上包被抗体。由于酶标板是由聚苯乙烯制成,其含有的苯环与抗体的氨基酸残基具有类似π-π堆积作用的引力,结合静电和疏水作用,可以将抗体吸附于其表面。然后,将未吸附的抗体用缓冲液清洗后,加入含有明胶或牛血清蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)的封闭液以封闭酶标板上未结合抗体的部分。加入封闭液的目的,是防止其他蛋白因静电或疏水作用吸附在96孔板上,造成假阳性信号,干扰后续实验的进行。
②:免疫识别 在96孔板上包被抗体后,加入待测样,并在37°C环境下孵育一段时间,通常是1-2小时。此时酶标板上的抗体与待测抗原进行特异性识别结合。此处抗体的质量是关键,好的抗体既能特异性高效地结合抗原又不受待测样中其他生物大分子、蛋白质和无机盐等成分的影响。
③:洗板 将未结合的抗原洗掉,加入该抗原所对应的识别抗体并在37°C下继续培养1-2小时,接着将未连接上抗原的抗体洗掉。
④:酶标信号输出 加入带有辣根过氧化酶(Horseradish Peroxidase, HRP)标记的酶标二抗,用于和标准抗体结合。在培养30分钟后洗掉未连接的二抗,并加入显色剂显色。根据显色的结果判断抗原的浓度。一般认为,抗原浓度与显色后的发光强度呈正相关。
免疫竞争法
以抗原竞争抗体为例,在上述免疫夹心法操作步骤的第二步加入待测抗原后,立刻加入酶标抗原,使之与待测抗原竞争识别酶标板上的抗体。当待测抗原浓度越高,能够连上酶标板上抗体的酶标抗体就越少,输出的信号就越少。这样待测样浓度与酶显色信号就呈逆相关。

elisa的原理和实验步骤?

1. ELISA的原理
  ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记.结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性.在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应.用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开.再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上.此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例.加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析.由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度.
操作步骤:
1.从已平衡至室温的密封袋中取出试验所需板条,未用的板条和干燥剂请放回铝箔袋内压 实自封条,密封口袋,放回4℃.
2.空白孔加标准品和标本稀释液,其余相应孔中加标本或不同浓度标准品(100ul/孔),用封板胶纸封住反应孔,36℃孵箱孵育90分钟.
3.提前20分钟准备生物素化抗体工作液.
4.洗板5次.
5.空白孔加生物素化抗体稀释液,其余孔加入生物素化抗体工作液(100ul/孔).用新封板胶纸封住反应孔,36℃孵箱孵育60分钟.
6.提前20分钟准备酶结合物工作液.避光室温(22-25 ) ℃ 放置.
7.洗板5次.
8.空白孔加酶结合物稀释液,其余孔加入酶结合物工作液(100ul/孔).用新封板胶纸封住反应孔,36℃孵箱,避光孵育30分钟.
9.打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序.
10.洗板5次.
11.加入显色底物(TMB)100ul/孔,避光36℃孵箱,避光孵育15分钟.
12.加入终止液100ul/孔,混匀后即刻测量OD450值(3分钟内).在仪器保存读数结果并打印一份纸质结果.
13.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回电冰箱保存至有效期结束.
建议保存酶标板框,以备下次或者今后试验使用.,10,检测原理: 本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人IL-4单抗包被于酶标板上,操作步骤: 1.从已平衡至室温的密封袋中取出试验所需板条,未用的板条和,1,1. ELISA的原理
  ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此...,1,

ELISA实验步骤有哪些?

ELISA实验原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。
酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色氧化型,出现颜色反应。
因此,可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应,颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定,这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来,使ELISA方法成为一种既特异又敏感的检测方法。
ELISA实验步骤及注意事项:
1、固相载体选择
聚苯乙烯:具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性。
聚氯乙烯:聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值也略高。
良好的ELISA板应该是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之间、同一板各孔之间性能相近。
2、包被
①板孔的选择:ELISA级别的微孔板。
②抗体选择:选择支持ELISA实验的抗体,根据推荐浓度稀释或摸索最适浓度。
③包被缓冲液:pH9.6碳酸盐缓冲液或pH7.2磷酸盐缓冲液。
④包被温度:2-8 ℃过夜包被或室温(37℃)包被2h。
⑤包被浓度:包被浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化。一般包被浓度为10ug/ml-20ug/ml。
3、封闭
①包被之后一定要立即封闭(封闭非特异性抗体)。
②选择效果较好的封闭剂(细胞培养级BSA、Tween等)。
4、加样及孵育
①加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。
②孵育的时间及温度参考试剂盒说明书。如有条件,建议加样孵育时使用shaker震荡仪,推荐轨道直径3mm,转速在500±50rpm。
③检测抗体、酶标物的稀释比例、孵育温度、孵育时间严格根据说明书提示。
④洗板对于ELISA来说,是极其关键的一步,保证ELISA的特异性。
⑤封板膜一定要一次一换,切勿二次甚至多次使用,以防交叉污染。
5、显色和终止
①使用前需检查,底物在加入96孔板之前应为无色透明。
②显色底物需现配现用,避免污染。
③孵育时间,说明书上为参考范围,具体需要根据实验条件自行摸索。可参考标曲浓度最大孔的颜色,变为蓝色较明显时即可。

ELISA实验检测抗体的实验步骤?

1、包被抗原(制备包被板)
2、加入待测抗体,37℃反应1小时,洗板。
3、加入酶标二抗,37℃反应1小时,洗板。
4、加入底物,室温避光15min后用硫酸终止读数。
操作步骤:
  (1)将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。
  (2)加稀释的受检血清,保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,血清中的其他成份在洗涤过程中被洗去。
  (3)加酶标抗抗体,主要根据你的一抗来确定二抗用什么。可用酶标抗人Ig以检测总抗体,但一般多用酶标抗人IgG检测IgG抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗体抗体结合,从而间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量与标本中受检抗体的量正相关。
  (4)加底物显色
间接法由于采用的酶标二抗是针对一类免疫球蛋白分子(如抗人IgG),因此该法只需要换固相抗原,即可用一种酶标二抗检测各种与抗原相应的抗体,具有更广泛的通用性。
本法主要用于对病原体抗体的检测而进行传染病的诊断。间接法的优点是只要变换包被抗原就可利用同一酶标抗抗体建立检测相应抗体的方法。
如果有其他问题,可以联系我,呵呵!

测细胞因子IL-4的ELISA实验怎么做

测细胞因子IL-4的ELISA实验做法步骤
1,从已平衡至室温的密封袋中取出所需板条,其它板条密封放回4度。
2,除空白孔外,分别将标本或不同浓度标准品孔加入相应孔中,用封板胶纸封住反应孔,37度孵箱孵育90分钟。
3,洗板4次。
4,除空白孔外,加入生物素化抗体工作液。用封板胶纸封住反应孔,37度孵箱孵育60分钟。
5,洗板4次。
6,除空白孔外,加入酶结合物工作液。用封板胶纸封住反应孔,37度孵箱孵育30分钟。
7,洗板4次。
8,加入显色剂,避光37度孵箱孵育15分钟。
9,加入终止液混匀后即刻测量OD450值。

elisa实验原理

elisa实验原理是:通过特定抗原与抗体的相互作用来检测和定量分析目标物质。
下面将详细介绍ELISA实验的原理:
1.ELISA的基本原理
实验基于抗原与抗体的高度特异性结合,利用酶标记技术和吸附作用进行检测和定量分析。基本步骤包括:涂覆固相载体、非特异性结合位点的阻断、特异性抗原与抗体的结合、酶标记二抗的结合、底物添加和反应终止。
通过测量底物的酶催化生成物的颜色或荧光强度,可以间接反映出目标物质的存在量。
2.直接ELISA的原理
直接ELISA中,目标抗原直接与被酶标记的抗体结合。具体步骤包括:将抗原溶液加到固相载体上,使其吸附;添加被酶标记的特异性抗体,形成抗原-抗体复合物;洗涤去除未结合的物质;加入底物,被酶催化生成可测量的产物。产生的信号强度与目标抗原的浓度成正比。
3.间接ELISA的原理
间接ELISA中,目标抗原首先与非酶标记的特异性抗体结合,然后再与被酶标记的二抗结合。具体步骤包括:将抗原溶液加到固相载体上,使其吸附;添加非酶标记的抗体,形成抗原-抗体复合物。
洗涤去除未结合的物质;加入被酶标记的二抗,与抗原-抗体复合物结合;再次洗涤去除未结合的物质;加入底物,被酶催化生成可测量的产物。产生的信号强度与目标抗原的浓度成正比。
4.间接竞争ELISA的原理
间接竞争ELISA在间接ELISA的基础上进行了一些修改,用于检测样品中特定抗原的存在量。具体步骤包括:将抗原溶液加到固相载体上,使其吸附。
加入被酶标记的特异性抗体和待测样品;洗涤去除未结合的物质;加入底物,被酶催化生成可测量的产物。产生的信号强度与待测样品中特定抗原的浓度成反比。
ELISA实验的原理基于抗原与抗体的特异性结合、酶标记技术和底物反应等步骤,通过测量产生的信号强度来定量分析和检测目标物质的存在量。不同类型的ELISA实验可以根据实验设计和样品特点选择合适的方法,以满足不同的研究需求。

大鼠17-β-雌二醇(17β-Estradiol)ELISA试剂盒的实验步骤

操作步骤:
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
注意要点:请仔细阅读产品的详细使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果.
操作注意事项
1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

酶联免疫吸附测定实验(ELISA)的操作流程,谢谢大家

(1) 加入50uL的标准品或样品于所设定的孔中;
(2) 在每孔中加入100uL一抗, 轻轻摇动微孔板混匀1分钟;
(3) 室温(22.5±2.5)°C避光孵育30分钟;
(4) 洗板3次,每次加入250uL 1×洗液,最后一次尽量甩干并在吸水纸上吸干;
(5) 每孔加入150uL1×二抗(避免阳光直射和工作台温度过低,孵育时适当覆盖微孔板);
(6) 室温(22.5±2.5)°C避光孵育30分钟;
(7) 洗板3次,每次加入250uL1×洗液,最后一次尽量甩干并在吸水纸上吸干;
(8) 加入100uL的TMB底物(底物本身无色,出现颜色变化不能使用);
(9) 室温(22.5±2.5)°C避光孵育孵育10-15分钟,加入100uL的终止液终止反应,在450nm下读OD值(读数前使用无绒布擦拭微孔底部水分和指模)。
博奥通科科技(北京)有限公司
010-51560615
  Elisa 操作流程(以人IL-4 ELISA KIT为例):
  检测原理:
  本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人IL-4单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的IL-4会 与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人IL-4抗体和辣根过氧化物酶标记的亲 和素。生物素与亲和素特异性结合;抗人IL-4抗体与结合在单抗上的人IL-4结合而形成免疫 复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有IL-4,辣根过氧化物酶会使无色 的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450nm处测OD值,IL-4浓度与OD450值之间呈正比,可 通过绘制标准曲线求出标本中IL-4的浓度。
  试剂盒组成:
  1.抗体预包被酶标板(8×12 或 8×6)
  2.冻干标准品(2 / 1 支;0.5ng/支)
  3.标准品和标本稀释液(橙盖瓶)(1 瓶;20ml/12ml)
  4.浓缩生物素化抗体(紫盖瓶)(1 支)
  5.生物素化抗体稀释液(蓝盖瓶)(1 瓶;16ml/10ml)
  6.浓缩酶结合物(棕盖瓶)(1 支)
  7.酶结合物稀释液(紫盖瓶)(1 瓶;16ml/10ml)
  8.浓缩洗涤液 20× (白盖瓶)(1 瓶;50ml/25ml)
  9.显色底物(TMB)(棕盖瓶)(1 瓶;12ml/6ml)
  10.反应终止液(红盖瓶)(1 瓶;12ml/6ml)
  11.封板胶纸(6/3 张)
  12.产品说明书(1 份)
  标本收集:
  1. 收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
  2. 血浆抗凝剂推荐使用EDTA。避免使用溶血,高血脂标本。
  3. 标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。
  4. 标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃,-70℃电冰箱内,避免反复冻融,3-6月内检测。
  5. 如果您的样本中检测物浓度高于标准品最高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建 议做预实验,以确定稀释倍数)。
  注意事项:
  1. 试剂盒使用前请保存在2-8℃。复溶后的标准品应分装后,将其放在-20~-70℃贮存。
  2. 浓缩生物素化抗体,浓缩酶结合物体积小,运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁 或瓶盖。因此使用前请用手甩几下或1000转/分离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。取用前,请用移液器小心吹打4-5次使溶液混匀。
  3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,微加热至40℃使结晶完全溶解后 再配制洗涤液。(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。
  4. 若需要分次使用标准品应按照每一次用量分装,将其放在-20~-70℃贮存。避免反复冻 融。
  5. 不同批号的试剂盒组份不能混用(洗涤液和反应终止液除外)。
  6. 充分轻微混匀对反应结果尤为重要,最好使用微量振荡器(使用最低频率),如无微量振荡器,可在反应前手工轻轻敲击酶标板框混匀。
  7. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。
  8. 试验中所用的试管和吸头均为一次性使用,严禁在不同的液体之间混用!否则将影响试 验结果。
  9. 试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时, 请按国家生物试验室安全防护条列执行。
  检测前准备工作:
  1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,以平衡至室温。
  2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:20)。未用完的放回4℃。
  3. 标准品: 加入标准品/标本稀释液0.5ml至冻干标准品中,静置15分钟,待其充分溶解后,轻轻混匀(浓度为1000 pg/ml)。然后根据需要进行稀释。(建议标准曲线使用以下浓度: 1000、500、250、125、62.5、31.25、15.6、0 pg/ml)。复溶标准品原液(1000 pg/ml)若未用完请分装后放入-20℃以下电冰箱内保存,保存两个月。已稀释的标准品请废弃。
  4. 生物素化抗体工作液:按当次试验所需要得用量,使用前20分钟,以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:30)成工作浓度。当日使用。若实验次数过多导致生物素化 抗体量不足,可向我们公司单独购买生物素化抗体。(须提供抗体批号)
  5. 酶结合物工作液:按当次试验所需要得用量,使用前20分钟,以酶结合物稀释液稀释浓 缩酶结合物(1:30) 成工作浓度。当日使用。若实验次数过多导致浓缩酶结合物量不足, 可向我们公司单独购买浓缩酶结合物。(须提供酶结合物批号)
  洗涤方法:
  1. 自动洗板机:要求注入的洗涤液为350ul,注入与吸出间隔15-30秒。洗板5次。
  2. 手工洗板:甩尽孔内液体,在洁净的吸水纸上拍干,每孔加洗涤液350ul,静置30秒后甩尽液体,在厚迭吸水纸上拍干。洗板5次。
  操作步骤:
  1.从已平衡至室温的密封袋中取出试验所需板条,未用的板条和干燥剂请放回铝箔袋内压 实自封条,密封口袋,放回4℃。
  2.空白孔加标准品和标本稀释液,其余相应孔中加标本或不同浓度标准品(100ul/孔),用封板胶纸封住反应孔,36℃孵箱孵育90分钟。
  3.提前20分钟准备生物素化抗体工作液。
  4.洗板5次。
  5.空白孔加生物素化抗体稀释液,其余孔加入生物素化抗体工作液(100ul/孔)。用新封板胶纸封住反应孔,36℃孵箱孵育60分钟。
  6.提前20分钟准备酶结合物工作液。避光室温(22-25 ) ℃ 放置。
  7.洗板5次。
  8.空白孔加酶结合物稀释液,其余孔加入酶结合物工作液(100ul/孔)。用新封板胶纸封住反应孔,36℃孵箱,避光孵育30分钟。
  9.打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。
  10.洗板5次。
  11.加入显色底物(TMB)100ul/孔,避光36℃孵箱,避光孵育15分钟。
  12.加入终止液100ul/孔, 混匀后即刻测量OD450值(3分钟内)。在仪器保存读数结果并打印一份纸质结果。
  13.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回电冰箱保存至有效期结束。
  建议保存酶标板框,以备下次或者今后试验使用。
  结果判断:
  1. 每个标准品和标本的OD值应减去空白孔的OD值。
  2. 手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,以平滑线连接各标准品的坐标点。通过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。
  3. 若标本OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。
  灵敏度、特异性和重复性:
  ● 灵敏度:最小可测人IL-4达7pg/ml。
  ● 特异性:不与IL-1,2,3,5,6,8,10,12,IFN,TNF及sTNF-RII等反应。
  ● 重复性:板内,板间变异系数均<10%。